ScreenFect™A plus　トランスフェクション性能

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＊MCF-7: ヒト乳腺ガン由来（上皮細胞様形態）（接着系）
＊導入方法： A社 新製品 → 2-Step ScreenFect™A plus → 1 Step

導入困難細胞へのトランスフェクション効率を改善！

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＊MDCK: イヌ腎臓尿細管上皮細胞由来（接着系）
＊導入方法: A社 新製品 → 2-Step ScreenFect™A plus → 1 Step

導入困難細胞へのトランスフェクション効率を改善！

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＊K562: ヒト慢性骨髄性白血病細胞由来（浮遊系）
＊導入方法: A社 新製品 → 2-Step ScreenFect™ A plus → 1 Step

浮遊系 導入困難細胞へのトランスフェクション効率を改善！

アプリケーションデータ

1.LNCaP細胞（接着系）へのYFP融合遺伝子導入実験 　　　　　　　　　　　　　　　

LNCaP細胞（接着系）へYFP融合遺伝子の導入実験を行い、蛍光顕微鏡にて導入遺伝子の発現効率を比較しました。
ScreenFect™A plusとエンハンサー試薬であるSFA P-reagentを用いることで、他社製品と同等以上の発現効率を示しました。
※BioWindow No.144 （2016年6月号）掲載データ

LNCap（ヒト前立腺がん）における性能比較

2.HeLa細胞（接着系）へのEGFP_mRNA導入実験 　　　　　　　　　　　　　　　

HeLa細胞（接着系）へEGFP_mRNAの導入実験を行い、蛍光顕微鏡にてEGFPの発現効率の比較を行いました。
ScreenFect™A plusとエンハンサー試薬であるSFA P-reagentを用いることで、他社製品と同等以上の発現効率を示しました。
※BioWindow No.144 （2016年6月号）掲載データ

HeLaにおけるmRNAトランスフェクションの性能比較

　　〔播種細胞数〕0.7×10⁵ cells/well
　　〔mRNA量〕0.1µg/assay
　　〔トランスフェクション試薬混合比率〕mRNA量(µg) : ScreenFect™A plus reagent(µl) = 1 : 4
　　〔well format〕24well プレート
　　〔検出時間〕トランスフェクション後48時間
　　〔露光時間〕2秒

3.hiPSC（201B7株）へのGFP融合遺伝子導入実験 　　　　　　　　　　　　　　　

hiPSC（201B7株）へリバーストランスフェクション（1-STEP）でGFP融合遺伝子の導入実験を行い、蛍光顕微鏡およびフローサイトメーターにて導入遺伝子の発現効率を比較しました。
hiPS細胞はリバーストランスフェクション法によるトランスフェクションが最も効果的であり、StemSure^® hPSC培地ΔとmTeSR™1両培地において、ScreenFect™A plus は他社製品と同等以上の導入効率を示しました。
※BioWindow No.144 （2016年6月号）掲載データ

hiPSC(201B7株)における性能比較

　
　

ScreenFect™A plus および他社品のトランスフェクション条件
　〔細胞数〕5×10⁵cells/well
　〔プラスミドDNA量〕1µg/assay
　〔トランスフェクション試薬混合比率〕pDNA量(µg):ScreenFect™A plus reagent(µL)= 1:2
　〔well format〕12wellプレート
　〔備考〕SFA plus reagent および pDNAはOpti-MEM^®で希釈しました。

4.HeLa細胞（接着系）へのPIK3CB siRNA導入実験 　　　　　　　　　　　　　　　

HeLa細胞へリバーストランスフェクション法及びフォワードトランスフェクション法でPIK3CB siRNAの導入実験を行い、リアルタイム定量PCRでPIK3CB mRNAの発現量を測定しました。
定量結果を元に他社製品とノックダウン効率の比較を行ったところ、ScreenFect™A plusは他社製品と同等以上のノックダウン効率を示しました。
※BioWindow No.149 （2017年3月号）掲載データ

HeLa細胞における性能比較

1-Stepと2-Step 手法比較

Product	ScreenFect™A plus	Company A's new product (+ reagent)	Company A's product
諸条件	1-Step	2-Step
プロトコール日数	2 Days	3 Days
DNA量	少	多
細胞数調整	随時調整可能	前培養条件に依存
トリプシン処理	トランスフェクション時	前培養時
HTSセルベースアッセイ操作性	+++++	+
培地交換	細胞による

ScreenFect™A plus　One-step法　概要

One-step法　→　トランスフェクションから本解析までの時間を24時間短縮！

ScreenFect™A plus　トランスフェクション条件

DNA Transfection

DNA transfection (/well)
Plate size	Surface area	Medium volume	Total volume SF-DNA complex	DNA /Dilution Buffer	ScreenFect™A plus /Dilution Buffer
96 wells	0.3 cm2	100 μL	10 μL	~ 100 ng / 10 μL	~ 0.4 μL/10 μL
24 wells	2 cm2	500 μL	50 μL	~ 500 ng / 40 μL	~ 2.0 μL/40 μL
12 wells	4 cm2	1000 μL	100 μL	~ 1,000 ng / 70 μL	~ 4.0 μL/70 μL
6 wells	10 cm2	2000 μL	250 μL	~ 2,500 ng / 120 μL	~ 10 μL/120 μL

注: ラージスケールトランスフェクションを行う際には、マイクロチューブを複数本準備のうえトランスフェクションして下さい。
（例；10 cm dish トランスフェクション相当→ 5 - 6 サンプル（6 wellsプレート）

ScreenFect™A plus 推奨プロトコール

※現品添付の説明書に簡易プロトコールを記載しております。下記URL・QRコードからアクセスしてください。

ScreenFect™A plusでは、1-Stepトランスフェクション法を推奨しています。詳細は前ページをご参照下さい。 本試薬では、十分なトランスフェクション効率を得るため、プラスミドDNAとトランスフェクション試薬の混合比率は、 1 : 3 ～ 1 : 4 ( DNA 100ng : ScreenFect™A plus reagent 0.1μL = 1 : 1　と規定します )を最適レンジとして推奨します。 また、トランスフェクション時の細胞毒性をより抑えたい場合には、60%-80%コンフルエントの細胞をご使用下さい。

詳しくは、左記載のURLまたはスマートフォン専用QRコードからアクセスのうえ、詳細情報をご参照下さい。 (https://screenfect.jp) なお、評価用無償サンプルもご用意しておりますので、サンプルオーダーフォームからご依頼下さい。

siRNA Transfection

siRNA transfection (/well)
Plate size	Surface area	Medium volume	Total volume SF-DNA complex	siRNA /Dilution Buffer	ScreenFect™ A plus /Dilution Buffer
96 wells	0.3 cm2	100 μL	10 μL	1 pmol /5 μL	0.1 ~ 0.3 μL/5 μL
24 wells	2 cm2	500 μL	50 μL	5 pmol / 25μL	0.5.~ 1.5 μL/25 μL
12 wells	4 cm2	1000 μL	100 μL	10 pmol / 50μL	1.0 ~ 3 μL/50 μL
6 wells	10 cm2	2000 μL	250 μL	25 pmol / 125μL	2.5 μL/ 125 μL

注: ScreenFect™A plusは、siRNAトランスフェクションにも使用できますが、siRNAトランスフェクションにはScreenFect™siRNAのご使用を推奨いたします。

ScreenFect™A & A plus 採用実績細胞

その他詳細情報は、導入実績データベースをご確認ください。

No. 細胞名 1 143BTK 2 786-O 3 A2058 4 A375 5 A549 6 B16 7 B16F10 8 Ba/F3-CH1 9 BEAS-2B 10 BEL-7402 11 BT549 12 C2C12 13 Cell line from killifish 14 CHO-K1 15 COS-7 16 DB lymphoma 17 DC 2.4 18 Du145 19 EL4 20 Endothelium cell 21 EPC(carp) 22 GP2-293 23 H9C2 24 HCT116 25 HEK293 26 HEK293 TN 27 HEK293A 28 HEK293F 29 HEK293FT 30 HEK293T 31 HeLa 32 HeLa S3 33 HEp-2 34 HepG2 35 hiPSC 36 HK2 37 HKC 38 HL7704 39 HuH-7 40 HUVEC 41 Ins-1 42 L428

No. 細胞名 43 LLC-MK2 44 LO2 45 LoVo 46 MC3T3 47 MC3T3-E1 48 MCF-10 49 MCF-10A 50 MCF-7 51 MDCK 52 MEF 53 mES 54 mHSC 55 Microglia 56 MLEC 57 MS-1 58 Myeloid dendritic cell (MDC) 59 NB1RGB 60 NCI-H1703 61 NE3 62 NIH 3T3 63 NK92 64 OLHNI-2 65 Mouse overy cell 66 PC12 67 Plat-E 68 PLC8024 69 Primary Fibroblast 70 RAW264.7 71 SH-SY5Y 72 SK-Hep1 73 SKOV3 74 T98G 75 TE-13 76 THP-1 77 U-251 MG 78 U2OS 79 U937 80 Vero 81 Drosophira ovary somatic cell 82 HT1080 83 RH7777 84 HaCaT

富士フイルム和光純薬株式会社では、 ScreenFect™データベースの使用実績例を随時更新しています。上記細胞種以外に適用可能かどうか不明な場合は、弊社までお問い合わせください。

ScreenFect™A plus 製品情報

コードNo.	品　名	Transfection Reagent	Dilution Bufferfor	希望納入価格（円）
293-77101	ScreenFect™A plus	0.2ml	10ml	9,000
299-77103		1ml	50ml	35,000
297-77104		1ml×5	5×50ml	140,000

＊製品コードをクリックするとSiyaku.comにリンクしますので、在庫はそちらからご確認下さい。

• ∙∙∙ 2〜10℃保存
• ∙∙∙ -20℃保存
• ∙∙∙ -80℃保存
• 表示がない場合は室温保存です。
• ∙∙∙ 特定毒物
• ∙∙∙ 毒物
• ∙∙∙ 劇物
• ∙∙∙ 化審法 第一種特定化学物質
• ∙∙∙ 化審法 第二種特定化学物質
• ∙∙∙ 毒薬
• ∙∙∙ 劇薬
• ∙∙∙ 化学兵器禁止法 第一種指定物質
• ∙∙∙ 化学兵器禁止法 第二種指定物質
• ∙∙∙ 向精神薬
• ∙∙∙ 特定麻薬向精神薬原料
• ∙∙∙ カルタヘナ

※掲載内容は、2016年10月時点での情報です。

掲載されている試薬は、試験・研究の目的のみに使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
表示している希望納入価格は「本体価格のみ」で消費税等は含まれておりません。
表示している希望納入価格は本記事掲載時点の価格です。

ScreenFect™ References

1. Diefenbacher, Markus E., et al. "The LIM Domain Protein nTRIP6 Recruits the Mediator Complex to AP-1-Regulated Promoters." PLoS ONE 9.5 (2014): e97549.
2. Freise, Christian, and Uwe Querfeld. "Inhibition of vascular calcification by block of intermediate conductance calcium-activated potassium channels with TRAM-34." Pharmacological Research (2014).
3. Hagiwara, Akane, et al. "Luteinizing Hormone-Induced Expression of Ptger4b, a Prostaglandin E2 Receptor Indispensable for Ovulation of the Medaka Oryzias latipes, Is Regulated by a Genomic Mechanism Involving Nuclear Progestin Receptor."
4. Peng, Yanyan, Ruidan Xu, and Xiaofeng Zheng. "HSCARG Negatively Regulates the Cellular Antiviral RIG-I Like Receptor Signaling Pathway by Inhibiting TRAF3 Ubiquitination via Recruiting OTUB1." PLoS pathogens 10.4 (2014): e1004041. (3)
5. Wakimoto, Hiroaki, et al. "Targetable signaling pathway mutations are associated with malignant phenotype in IDH-mutant gliomas." Clinical Cancer Research (2014). (2)
6. Fischer, Simon, et al. "Breaking limitations of complex culture media: Functional non-viral miRNA delivery into pharmaceutical production cell lines." Journal of biotechnology 168.4 (2013): 589-600.
7. Bai, Dongmei, et al. "Regulation of the HDM2-p53 pathway by ribosomal protein L6 in response to ribosomal stress." Nucleic acids research 42.3 (2014): 1799-1811.
8. Liu, Xing, et al. "Isocitrate dehydrogenase 2 mutation is a frequent event in osteosarcoma detected by a multi‐specific monoclonal antibody MsMab‐1." Cancer medicine 2.6 (2013): 803-814.